親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范-SF/Z JD0105001-2016-（2016修訂版）（2016年9月22日發(fā)布實(shí)施）
1、范圍
本技術(shù)規(guī)范規(guī)定了我國(guó)法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行親權(quán)鑒定所必須遵循的技術(shù)要求。
本技術(shù)規(guī)范適用于從事親權(quán)鑒定的DNA實(shí)驗(yàn)室，不適用于大通量數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)。
2、規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是不可少的。凡是標(biāo)注日期的引用文件，僅標(biāo)注日期的版本適用于本文件。凡是不標(biāo)注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
GA/T382-2014  法庭科學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)室建設(shè)規(guī)范
GA/T383-2014  法庭科學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)范
GA/T965  法庭科學(xué)DNA親子鑒定規(guī)范
CNAS-CL08  司法鑒定/法庭科學(xué)機(jī)構(gòu)能力認(rèn)可準(zhǔn)則
CNAS-CL28  司法鑒定/法庭科學(xué)機(jī)構(gòu)能力認(rèn)可準(zhǔn)則在法醫(yī)物證DNA鑒定領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明
3、術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本技術(shù)規(guī)范。
3.1　 
親權(quán)鑒定  Parentage Testing
親權(quán)鑒定是通過(guò)對(duì)人類遺傳標(biāo)記的檢測(cè)，根據(jù)遺傳規(guī)律分析，對(duì)個(gè)體之間血緣關(guān)系的鑒定。
3.2　 
三聯(lián)體親子鑒定  Parentage Testing of Trios
被檢測(cè)男子、孩子生母與孩子的親子鑒定或者被檢測(cè)女子、孩子生父與孩子的親子鑒定。
3.3　 
二聯(lián)體親子鑒定  Parentage Testing of Duos
被檢測(cè)男子與孩子的親子鑒定或被檢測(cè)女子與孩子的親子鑒定。
3.4　 
遺傳標(biāo)記  Genetic Marker
具有多態(tài)性的基因座。用于親子鑒定的遺傳分析系統(tǒng)由一定數(shù)量的遺傳標(biāo)記組成，常用的有常染色體短串聯(lián)重復(fù)序列（STR）、Y染色體短串聯(lián)重復(fù)序列（Y-STR）、X染色體短串聯(lián)重復(fù)序列（X-STR）。
3.5　 
排除概率  Power of Exclusion, PE
對(duì)于不是孩子生父的隨機(jī)男子，遺傳分析系統(tǒng)具有的排除能力。它是遺傳分析系統(tǒng)效能的評(píng)估指標(biāo)。
3.6　 
親權(quán)指數(shù)  Parentage Index, PI
親權(quán)指數(shù)是親權(quán)關(guān)系鑒定中判斷遺傳證據(jù)強(qiáng)度的指標(biāo)。它是兩個(gè)條件概率的似然比率:


4、總則
從事親子鑒定的機(jī)構(gòu)應(yīng)符合CNAS-CL08:2013中4.1條款的要求或是獲得法醫(yī)物證鑒定資質(zhì)的機(jī)構(gòu)。應(yīng)當(dāng)定期參加親子鑒定的能力驗(yàn)證計(jì)劃并考核合格。
5、檢驗(yàn)程序
5.1　采樣要求
對(duì)于三聯(lián)體，采集被檢測(cè)男子、孩子生母與孩子的樣本用于檢驗(yàn)；對(duì)于二聯(lián)體，采集被檢測(cè)男子與孩子的樣本用于檢驗(yàn)。樣本一般是血液（斑）或口腔拭子（唾液斑），其它人體生物學(xué)材料如精液（斑）、帶毛囊毛發(fā)、羊水、組織塊等亦可作為親權(quán)鑒定的樣本。對(duì)于接受了外周血干細(xì)胞移植的當(dāng)事人，應(yīng)避免采集其血樣作為檢驗(yàn)材料，宜取其口腔拭子（唾液斑）或毛發(fā)進(jìn)行檢驗(yàn)。樣本必須分別包裝，注明被采樣人姓名、編號(hào)、采樣人、采樣日期等，置于冰箱冷藏或凍存。
采樣時(shí)，需要填寫采樣單，寫明委托方名稱、采樣日期、采樣類型、被采樣人姓名、性別、稱謂、出生日期、證件號(hào)碼等，并拍攝被采樣人照片，由被采樣人在采樣單上留下右手拇指或食指指紋（嬰兒可留右腳拇趾?。?，并簽名確認(rèn)（嬰幼兒的姓名由其監(jiān)護(hù)人代簽）。
鑒定機(jī)構(gòu)應(yīng)有用于檢材/樣本的運(yùn)輸、接收、處置、保護(hù)、存儲(chǔ)、保留和/或清理的規(guī)定，應(yīng)對(duì)接收、內(nèi)部傳遞、處置、保留、返還和清理等過(guò)程進(jìn)行記錄，確保“保管鏈”記錄的完整性和可追溯性。
鑒定機(jī)構(gòu)應(yīng)具有能識(shí)別各檢材/樣本的標(biāo)識(shí)系統(tǒng)，并確保檢材/樣本在本鑒定機(jī)構(gòu)的整個(gè)期間能得到持續(xù)的識(shí)別。
5.2　DNA提取和純化
檢材的DNA提取和純化方法見GA/T383-2014中附錄A內(nèi)容。
5.3　DNA定量分析
見GA/T 383-2014中6.1~6.3條款內(nèi)容。
5.4　PCR擴(kuò)增與分型
5.4.1　基因座
5.4.1.1  選用多態(tài)性基因座（如STR、SNP等類型）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其中，常染色體STR基因座宜符合如下要求：
1） 基因座定義和具有的特征已有文獻(xiàn)報(bào)道；
2） 種屬特異性、靈敏性、穩(wěn)定性研究已實(shí)施；
3） 已有可供使用并公開發(fā)表的群體遺傳數(shù)據(jù)，群體遺傳數(shù)據(jù)包括從有關(guān)人群中獲得的該基因座等位基因頻率或單倍型頻率及突變率；
4） 遺傳方式符合孟德爾定律；
5） 串聯(lián)重復(fù)單位為四或五核苷酸。
5.4.1.2  除常染色體基因座外，建議在需要時(shí)增加Y-STR、X-STR的檢驗(yàn)。其中，Y-STR系統(tǒng)可選擇DYS456、DYS389I、DYS390、DYS389II、DYS458、DYS19、DYS385 a/b、DYS393、DYS391、DYS439、DYS635、DYS392、Y GATA H4、DYS437、DYS438、DYS448等基因座進(jìn)行單倍型檢驗(yàn)；X-STR系統(tǒng)可選用GATA172D05、HPRTB、DXS6789、DXS6795、DXS6803、DXS6809、DXS7132、DXS7133、DXS7423、DXS8377、DXS8378、DXS9895、DXS9898、DXS10101、DXS10134、DXS10135、DXS10074等。
5.4.2　PCR擴(kuò)增
建議選用商品化的試劑盒進(jìn)行PCR擴(kuò)增，每批檢驗(yàn)均應(yīng)有陽(yáng)性對(duì)照樣本（已知濃度和基因型的對(duì)照品DNA和/或以前檢驗(yàn)過(guò)的、已知基因型的樣本）以及不含人基因組DNA的陰性對(duì)照樣本。PCR擴(kuò)增體系與溫度循環(huán)參數(shù)均按試劑盒的操作說(shuō)明書進(jìn)行。
5.4.3　PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測(cè)與結(jié)果判讀
使用遺傳分析儀，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析，使用等位基因分型參照物（Ladder)來(lái)對(duì)樣本分型，步驟方法按照儀器操作手冊(cè)。
6、相關(guān)參數(shù)計(jì)算方法
6.1　三聯(lián)體親權(quán)指數(shù)（符合遺傳規(guī)律）的計(jì)算
見表1。
表1 三聯(lián)體常染色體STR基因座親權(quán)指數(shù)計(jì)算公式

生   母 基因型	孩   子 基因型	生父基因 （推斷）	被 檢 父 基因型	PI值計(jì)算 公式
PP	PP	P	PP	1/p
PP	PQ	Q	QQ	1/q
PP	PP	P	PQ	1/(2p)
PP	PQ	Q	QR	1/(2q)
PP	PQ	Q	PQ	1/(2q)
PQ	QQ	Q	QQ	1/q
PQ	QR	R	RR	1/r
PQ	QR	R	RS	1/(2r)
PQ	PR	R	PR	1/(2r)
PQ	QQ	Q	QR	1/(2q)
PQ	PQ	P或Q	PP	1/(p+q)
PQ	PQ	P或Q	QQ	1/(p+q)
PQ	PQ	P或Q	PQ	1/(p+q)
PQ	PQ	P或Q	PR	1/[2(p+q)]

注：p、q、r分別表示等位基因P、Q、R的分布頻率。

6.2　三聯(lián)體親權(quán)指數(shù)（不符合遺傳規(guī)律）的計(jì)算
見表2。
表2 遇到不符合遺傳規(guī)律時(shí)常染色體STR親權(quán)指數(shù)(PI)計(jì)算實(shí)例
( 以D13S317為例，平均突變率為0.002 )

基因座	母親	孩子	被檢測(cè)男子	親權(quán)指數(shù)
D13S317	7	7-8	9-11	µ / (4p8)
D13S317	7	7-8	10-11	µ / (40p8)
D13S317	7	7-8	11-12	µ / (400p8)
D13S317	7	7-8	9	µ / (2p8)
D13S317	7-8	8	9	µ / (2p8)
D13S317	7-8	8	7-9	2µ / (4p8)
D13S317	7-8	8	9-11	µ / (4p8)
D13S317	7-9	7-9	10-11	µ / [4(p7 + p9)]
D13S317	7-9	7-9	10	µ/ [2(p7 + p9)]
D13S317	7-9	7-9	8-10	3µ / [4(p7 + p9)]

注：1） 表中p7、p8、p9為相應(yīng)等位基因7、8、9的頻率。
2） 如果母親的表型為QQ, 孩子的表型為PQ, 被檢測(cè)男子表型為P'R, 其中P' 比P小或大1個(gè)或2個(gè)重復(fù)單位(s=1或2)。µ為該基因座平均突變率。p為等位基因P的頻率。
如果突變?yōu)?步(s=1), 則：PI =X/Y = µ/(4p)
如果突變?yōu)?步(s=2), 則：PI =X/Y = µ/(40p)
余此類推。
3） 偶爾會(huì)遇到不能區(qū)分STR不符合遺傳規(guī)律的現(xiàn)象是源自母親或是源自被檢測(cè)男子。此時(shí)親權(quán)指數(shù)的計(jì)算應(yīng)考慮男女突變率不相同。例如：D13S317基因座，母親為7-8，孩子為7-9，被檢測(cè)男子為7-8。父權(quán)指數(shù)計(jì)算方法為：

式中，mutf 8-9為被檢測(cè)男子的等位基因8突變?yōu)?的概率；mutm8®9為母親的等位基因8突變?yōu)?的概率。μf為男性突變率，μm為女性突變率。通常，男性突變率高于女性突變率。例如，男性突變率可取值0.002，而女性突變率可取值0.001～0.0005，為了便于實(shí)驗(yàn)室間的數(shù)據(jù)比較，推薦女性突變率可取值0.0005。
6.3　二聯(lián)體親權(quán)指數(shù)（符合遺傳規(guī)律）的計(jì)算
見表3。
表3 二聯(lián)體常染色體STR基因座親權(quán)指數(shù)計(jì)算公式

孩   子 基因型	被 檢 父 基因型	PI值計(jì)算 公式
PP	PP	1/p
PP	PQ	1/(2p)
PQ	PP	1/(2p)
PQ	PQ	(p+q)/(4pq)
PQ	PR	1/(4p)

注：p、q、r分別表示等位基因P、Q、R的分布頻率
6.4　二聯(lián)體親權(quán)指數(shù)（不符合遺傳規(guī)律）的計(jì)算
見表4。
表4 二聯(lián)體中存在不符合遺傳規(guī)律時(shí)遺傳標(biāo)記親權(quán)指數(shù)計(jì)算實(shí)例
( 以D7S820為例，平均突變率為0.002 )

基因座	孩子	被檢測(cè)男子 （被檢測(cè)女子）	親權(quán)指數(shù)
D7S820	7-8	9-11	µ/(8P8)
D7S820	7-8	10-11	µ/(80P8)
D7S820	7-8	11-12	µ/(800P8)
D7S820	7-8	9	µ/(4P8)
D7S820	8	9	µ/(2P8)
D7S820	8	7-9	2µ/(4P8)
D7S820	8	9-11	µ/(4P8)
D7S820	7-9	8-10	µ(2P7+P9)/(8P7P9)
D7S820	7-9	8	µ(P7+P9)/(4P7P9)
D7S820	7-9	6-10	µ(P7+P9)/(8P7P9)

注：1） 表中p7、p8、p9為相應(yīng)等位基因7、8、9的頻率。
2） 如果孩子的表型為PQ，被檢測(cè)男子表型為P'R，其中P'比P小或大1個(gè)或2個(gè)重復(fù)單位（s=1或2），µ為該基因座平均突變率，p為等位基因P的頻率，則親權(quán)指數(shù)計(jì)算方法為：
突變?yōu)?步(s=1)，則: PI =X/Y = µ/(8p)
突變?yōu)?步(s=2)，則: PI =X/Y = µ/(80p)
突變?yōu)?步(s=3)，則: PI =X/Y = µ/(800p)
余此類推。
7、鑒定意見
7.1　鑒定意見是依據(jù)DNA分型結(jié)果，對(duì)是否存在血緣關(guān)系作出的判斷。鑒定意見一般分“排除存在親權(quán)關(guān)系”和“支持存在親權(quán)關(guān)系”兩種情形。
7.2　三聯(lián)體親子鑒定和二聯(lián)體親子鑒定實(shí)驗(yàn)使用的遺傳標(biāo)記累計(jì)非父排除率均應(yīng)不小于0.9999，三聯(lián)體親子鑒定和二聯(lián)體親子鑒定累計(jì)非父排除率的計(jì)算參見附錄A。
7.3　為了避免潛在突變影響，任何情況下都不能僅根據(jù)一個(gè)遺傳標(biāo)記不符合遺傳規(guī)律就作出排除意見。
7.4　任何情況下都不能為了獲得較高的累計(jì)親權(quán)指數(shù)，將檢測(cè)到的不符合遺傳規(guī)律的遺傳標(biāo)記刪除。累計(jì)親權(quán)指數(shù)的計(jì)算見附錄B。
7.5　在滿足7.1~7.4的條件下，被檢測(cè)男子的累計(jì)親權(quán)指數(shù)小于0.0001時(shí)，支持被檢測(cè)男子不是孩子生物學(xué)父親的假設(shè)。鑒定意見可表述為：依據(jù)現(xiàn)有資料和DNA分析結(jié)果，排除被檢測(cè)男子是孩子的生物學(xué)父親。
7.6　在滿足7.1~7.4的條件下，被檢測(cè)男子的累計(jì)親權(quán)指數(shù)大于10000時(shí)，支持被檢測(cè)男子是孩子生物學(xué)父親的假設(shè)。鑒定意見可表述為：依據(jù)現(xiàn)有資料和DNA分析結(jié)果，支持被檢測(cè)男子是孩子的生物學(xué)父親。
7.7　在不能滿足7.5或7.6的指標(biāo)時(shí)，應(yīng)通過(guò)增加檢測(cè)的遺傳標(biāo)記來(lái)達(dá)到要求。
8、鑒定文書
親子鑒定文書的格式要求參照司法部司法鑒定管理局頒布的親子鑒定文書規(guī)范。
9　特別說(shuō)明
9.1　本規(guī)范適用的三聯(lián)體親子鑒定類型包括被檢測(cè)男子、孩子及其母親構(gòu)成的三聯(lián)體和被檢測(cè)女子、孩子及其父親構(gòu)成的三聯(lián)體兩種類型。
9.2　本規(guī)范適用的二聯(lián)體親子鑒定類型包括被檢測(cè)男子及孩子構(gòu)成的二聯(lián)體和被檢測(cè)女子及孩子構(gòu)成的二聯(lián)體兩種類型。
9.3　對(duì)于補(bǔ)充檢驗(yàn)的Y-STR、X-STR或線粒體DNA檢測(cè)結(jié)果，建議僅對(duì)Y或X染色體或線粒體特殊的遺傳規(guī)律進(jìn)行描述性分析，不推薦僅依據(jù)補(bǔ)充檢驗(yàn)的Y-STR或X-STR或線粒體DNA檢測(cè)結(jié)果出具明確的鑒定意見，也不推薦依據(jù)Y-STR或線粒體DNA計(jì)算得到的親緣關(guān)系指數(shù)與依據(jù)常染色體STR計(jì)算得到的親緣關(guān)系指數(shù)聯(lián)合計(jì)算。
9.4　如果在鑒定書里使用其他數(shù)學(xué)或詞語(yǔ)的表達(dá)式時(shí)，應(yīng)定義并解釋其含義，使委托人或法庭了解其意義。如要將親權(quán)指數(shù)值轉(zhuǎn)換為傳統(tǒng)使用的父權(quán)相對(duì)機(jī)會(huì)，應(yīng)同時(shí)給出轉(zhuǎn)換時(shí)所采用的前概率。例如，某案累計(jì)親權(quán)指數(shù)為10000時(shí)，可以表述為本案累計(jì)親權(quán)指數(shù)為10000，在假定父權(quán)前概率為0.5時(shí)，父權(quán)相對(duì)機(jī)會(huì)為0.9999。
9.5　本技術(shù)規(guī)范在7.5或7.6中的鑒定意見是以不考慮雙胞胎或者近親情況為前提的。近親情況應(yīng)采用另外的公式，并需全面、系統(tǒng)地結(jié)合其他因素做綜合分析。
 
 附 錄 A-（規(guī)范性附錄）
  排除概率計(jì)算
 A.1  排除概率（PE）確切地說(shuō)應(yīng)該是非父排除概率，指對(duì)于不是孩子生父的隨機(jī)男子，遺傳分析系統(tǒng)具有的排除能力。它是遺傳分析系統(tǒng)效能的評(píng)估指標(biāo)。
A.2  排除概率的計(jì)算
目前常用的DNA遺傳標(biāo)記，如STR一個(gè)基因座有多個(gè)等位基因，并且均為顯性。設(shè)pi代表群體中第i個(gè)等位基因頻率, pj代表群體中第j個(gè)等位基因頻率, 并且等位基因i不等于等位基因j，則排除概率為：
1）三聯(lián)體親子鑒定

2）二聯(lián)體親子鑒定  

 
A.3  上述公式是對(duì)于一個(gè)基因座而言的。親子鑒定不止使用一個(gè)基因座，有必要知道使用的全部遺傳標(biāo)記對(duì)于不是孩子生父的男子，否定父權(quán)有多大的可能性，即累計(jì)排除概率(cumulative probability of exclusion，CPE)。
計(jì)算累計(jì)排除概率的前提條件是一個(gè)遺傳標(biāo)記系統(tǒng)獨(dú)立于另一個(gè)系統(tǒng)。累計(jì)排除概率計(jì)算公式為：

上式中，PEk為第k個(gè)遺傳標(biāo)記的PE值。求出各個(gè)遺傳標(biāo)記的PE值后，可按公式求出累計(jì)排除概率(CPE)。
 
附 錄 B（規(guī)范性附錄）
累計(jì)親權(quán)指數(shù)計(jì)算 
多個(gè)遺傳標(biāo)記用于親子鑒定時(shí)，設(shè)每個(gè)遺傳標(biāo)記的親權(quán)指數(shù)分別為PI1，PI2，PI3，…PIn，n個(gè)遺傳標(biāo)記的親權(quán)指數(shù)相乘則為累計(jì)親權(quán)指數(shù)（Combined paternity index,CPI），則：
CPI=PI1×PI2×PI3×…×PIn (1、2、3、n代表第1、2、3、n個(gè)基因座的PI值)

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